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La HPLC se distingue de la chromatographie liquide traditionnelle («basse pression») car les pressions opérationnelles sont nettement plus élevées (50–350 bar), tandis que la chromatographie liquide ordinaire repose généralement sur la force de gravité pour faire passer la phase mobile à travers la colonne.
- Quelle est la différence entre la chromatographie sur colonne et HPLC?
- Pourquoi la HPLC est-elle appelée chromatographie liquide haute pression??
- À quoi sert la chromatographie liquide?
- Combien de types de HPLC existe-t-il?
- Quels sont les détecteurs utilisés en HPLC?
- Pourquoi le pH est important en HPLC?
- La HPLC est-elle quantitative ou qualitative?
- Quel est le principe de base de HPLC?
- Quels sont les 4 types de chromatographie?
- Quel liquide est utilisé pour la chromatographie?
- Comment manipulez-vous les instruments HPLC?
Quelle est la différence entre la chromatographie sur colonne et HPLC?
La chromatographie liquide haute performance est fondamentalement une forme hautement améliorée de chromatographie sur colonne. Au lieu de laisser un solvant s'égoutter à travers une colonne sous l'effet de la gravité, il est forcé à travers sous des pressions élevées allant jusqu'à 400 atmosphères. Cela le rend beaucoup plus rapide.
Pourquoi la HPLC est-elle appelée chromatographie liquide haute pression??
Petites tailles de particules [<10 microns] sont nécessaires pour améliorer le pouvoir de séparation. Cependant, les particules plus petites ont une plus grande résistance à l'écoulement, de sorte que des pressions plus élevées sont nécessaires pour créer le débit de solvant souhaité. ... Cela s'appelait la chromatographie liquide haute pression, ou HPLC.
À quoi sert la chromatographie liquide?
La chromatographie est utilisée pour séparer les protéines, les acides nucléiques ou les petites molécules dans des mélanges complexes. La chromatographie liquide (LC) sépare les molécules dans une phase mobile liquide en utilisant une phase stationnaire solide. La chromatographie liquide peut être utilisée pour des applications analytiques ou préparatives.
Combien de types de HPLC existe-t-il?
Les analyses HPLC se répartissent en quatre catégories différentes: (1) chromatographie en phase inverse où la phase stationnaire est hydrophobe (C18-silice modifiée), (2) chromatographie en phase normale où la phase stationnaire est hydrophile (silice), (3) chromatographie d'interaction hydrophile, un hybride des techniques 1 et 2, et (4) ion ...
Quels sont les détecteurs utilisés en HPLC?
Détecteurs HPLC
- Détecteurs UV-Vis. Les SPD-20A et SPD-20AV sont des détecteurs UV-Vis à usage général offrant un niveau exceptionnel de sensibilité et de stabilité. ...
- Détecteur d'indice de réfraction. ...
- Détecteurs de fluorescence. ...
- Détecteur de dispersion de lumière évaporative. ...
- Détecteur de conductivité.
Pourquoi le pH est important en HPLC?
Lorsque les échantillons contiennent des composés ionisables, le pH de la phase mobile peut être l'une des variables les plus importantes dans le contrôle de la rétention dans une séparation HPLC en phase inversée (RP-HPLC). ... Étant donné que la plupart des composés analysés par RP-HPLC contiennent un ou plusieurs groupes fonctionnels acides ou basiques, la plupart des phases mobiles nécessitent un contrôle du pH.
La HPLC est-elle quantitative ou qualitative?
Pour la plupart des analyses HPLC, les aires de pic sont utilisées pour les calculs quantitatifs, bien que, dans la plupart des cas, des résultats équivalents puissent être obtenus avec la hauteur de pic.
Quel est le principe de base de HPLC?
Le principe de séparation de la HPLC est basé sur la répartition de l'analyte (échantillon) entre une phase mobile (éluant) et une phase stationnaire (matériau de garnissage de la colonne). En fonction de la structure chimique de l'analyte, les molécules sont retardées en passant la phase stationnaire.
Quels sont les 4 types de chromatographie?
Il existe quatre principaux types de chromatographie. Il s'agit de la chromatographie liquide, de la chromatographie en phase gazeuse, de la chromatographie sur couche mince et de la chromatographie sur papier. La chromatographie liquide est utilisée dans le monde pour tester des échantillons d'eau pour rechercher la pollution dans les lacs et les rivières.
Quel liquide est utilisé pour la chromatographie?
Les phases liquides non polaires courantes comprennent le silicone et divers hydrocarbures. Une alternative à ce type de colonne est utilisée en HPLC, dans laquelle une phase liquide liée est utilisée comme phase stationnaire. Le liquide le moins polaire est lié chimiquement au gel de silice polaire dans la colonne.
Comment manipulez-vous les instruments HPLC?
Nettoyez la seringue avec l'échantillon avant d'injecter l'échantillon dans HPLC. Puis injectez et chargez l'échantillon dans HPLC, les composants de l'échantillon seront détectés par le détecteur et le temps sera compté. 12. Le pic de chaque composant sera affiché sur le moniteur à des temps de rétention différents.
